VARIACIÓN DE EXTRACCIÓN DE ADN USANDO DIFERENTES ALCOHOLES.
GUTIERREZ,
Romina y TERSOGLIO, Sofía
SUMMARY
The present communication reports the successful extraction of genomic DNA from vegetables
starting from different alcohols to determine which is the most suitable for extraction.
RESUMEN
La presente reporte informa sobre la extracción exitosa de ADN genómico de vegetales a partir
de diferentes alcoholes y así determinar cuál es el más adecuado para su extracción.
KEY WORDS: DNA, Etanol, Metanol y Propanol.
INTRODUCCIÓN
La
obtención de ácido desoxirribonucleico (ADN), es el punto de partida para la
mayoría de análisis genéticos; incluso contando con pequeñas cantidades de ADN,
debido a esto en el presente reporte se analizar la manera con más eficacia de
extraer ADN en cebollas, bananas y tomates, que luego podrá ser
utilizado para identificar la membrana celular, enlaces, entre otros, aunque no
será en su estado puro debido a que este presentara pequeños fragmentos de ARN.
Esta
práctica requiere de varias etapas básicas. En primer lugar tiene que romperse
la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al
núcleo de la célula y luego la membrana nuclear para dejar
libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que
puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que se precipite
en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en
alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y el
agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros
componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa. La sal
evita la unión de las proteínas al ADN.
El alcohol
etílico o etanol es un tipo de alcohol
primario, que se lo utiliza como un antiséptico que ejerce su
acción desnaturalizando proteínas. Se caracteriza por ser volátil. Por tanto, su
sustantividad es escasa y con su uso prolongado tiende a dañar los materiales. Mientras que el alcohol propílico o propanol es un alcohol
secundario de
tipo desinfectante (antiséptico), incoloro, muy miscible en agua, tóxico e
inflamable. A diferencia del alcohol etílico, no destruye el material de
los objetos por lo que se lo puede utilizar sin restricción.El alcohol metílico es un líquido incoloro,
transparente, volátil, con aroma y sabor semejantes a los del etanol. Es
bastante inflamable y posee propiedades desinfectantes y antisépticas.
HIPÓTESIS
En
el proceso de extracción de ADN en vegetales el alcohol etílico va a ser el más
efectivo ya que este desnaturaliza proteínas, aunque como daña los materiales
es posible que resulte similar al alcohol propílico ya que este último no lo
hace. El proceso se producirá en la cebolla con más facilidad porque el
material genético que se encuentra en el núcleo es más sencillo de romper que
en las demás.
MATERIALES
Y MÉTODOS
Se
morteriza la cebolla, junto con una pizca de sal y 5ml de agua fría. Luego se
cierne la mezcla sobre un vaso de precipitados y se le agrega 30ml de
detergente, el cual va a romper las membranas plasmáticas restantes junto con
los restos de membrana nuclear, permitiendo mayor obtención de material genético,
y se mezcla. Después de haberlo dejado reposar, verter el resultado en un tubo
de ensayo y agregar el doble de alcohol por las paredes del tubo hasta que se
formen dos capas. Se elevará al alcohol y observara un material blanco lo cual
es acumulación de fibras de ADN. Extraer cuidadosamente con una pinza las
fibras y analizarlas. Este procedimiento se repite en otros tubos, para los
demás alcoholes y con los demás vegetales.
RESULTADOS
ETILICO
|
METILICO
|
PROPILICO
|
|
CEBOLLA
|
1cm
|
||
BANANA
|
0.3cm
|
0.2cm
|
0cm
|
TOMATE
|
0.4cm
|
0.3cm
|
0.8cm
|
CONCLUSIÓN
Al
finalizar el proceso se evidencia que el alcohol más atinado fue el etílico, ya
que tiene la capacidad de desnaturalizar proteínas y facilitó la observación
del ADN produciendo mayores cantidades de este. Los demás alcoholes cumplieron
con el objetivo en la mayoría de los casos pero no como el primero.
Con
respecto a los vegetales la de mayor producción fue la cebolla seguido el
tomate y por último la banana esto fue debido a la dificultad para romper la
pared nuclear.
BIBLIOGRAFIA
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